月华胶囊对耐多药结核分支杆菌感染自噬的影响

目的:以月华胶囊含药血清对耐多药结核分支杆菌感染小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)进行干预,探讨其对耐多药结核分支杆菌感染巨噬细胞自噬的作用及其机制。方法:低温冷冻干燥法制备月华胶囊,大鼠按3.02 g·kg^-1灌胃给药7 d,制备月华胶囊含药血清。体外培养RAW264.7,耐多药结核分子杆菌。以细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测含药血清对RAW264.7的增殖能力并选定其有效浓度。细胞分为模型组(10%胎牛血清);月华胶囊含药血清组(10%月华胶囊);自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)+月华胶囊含药血清组(5 mg·L^-1的3-MA+10%月华胶囊含药血清);雷帕霉素(Rap)组(200 mg·L^-1的Rap+10%胎牛血清);正常组(10%胎牛血清)。除正常组外,各组细胞培养24 h后,按细胞-细菌1∶10感染4 h。透射电镜观察细胞自噬体的出现和形成;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中I型微管相关蛋白轻链3(LC-3Ⅰ),Ⅱ型微管相关蛋白轻链3/I型微管相关蛋白1轻链3(LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ),Beclin-1蛋白的表达;间接免疫荧光染色法观察细胞中LC3B荧光颗粒、斑点及亮度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中LC3,Beclin-1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量均无显著变化,细胞无荧光颗粒、斑点,无荧光亮度。与模型组比较,月华胶囊含药血清组及Rap组细胞,均可观察到自噬体的形成,细胞LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均明显升高(P<0.05),月华胶囊含药血清组细胞荧光颗粒和荧光斑点明显增多,Rap组细胞荧光颗粒和荧光斑点增多非常明显,荧光闪亮,可判定细胞荧光呈现为阳性;自噬抑制剂3-MA+月华胶囊含药血清组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均无明显升高。结论:月华胶囊含药血清能使耐多药结核分支杆菌感染细胞产生自噬而发挥抗结核的免疫效应,其机制是通过调控自噬相关蛋白LC3,Beclin-1蛋白及其mRNA的表达水平,促使LC3-I趋向LC3-Ⅱ的转化加快而实现的。     

六西格玛在肿瘤标志物质量目标选择上的应用

目的应用6σ理论对肿瘤标志物项目的分析性能进行评价，并初步确定各项目的质量目标。 方法收集本实验室2018年1至12月室内质控数据和国家卫生健康委临床检验中心室间质量评价结果，以生物学变异导出的质量规范和国家室间质量评价标准作为允许总误差(TEa)计算6项肿瘤标志物的σ水平，并依据质量目标选择流程图和肿瘤标志物分析性能验证图评价肿瘤标志物的分析性能，进而为肿瘤标志物选择合适的质量目标。 结果应用不同层级的生物学变异导出的质量规范和国家室间质量评价标准，肿瘤标志物项目的σ水平存在显著差异；依据质量目标选择流程图：选择生物学变异导出的"适当的"质量规范作为CA125项目的质量目标，选择生物学变异导出的"最低的"质量规范作为t-PSA、CEA、AFP、CA199和CA153项目的质量目标。 结论6σ能够客观评价肿瘤标志物的分析性能，并为实验室质量目标的选择提供重要的参考价值。     

医学信息工程专业导论课程设计与实施

为了提高学生对医学信息工程专业的专业定位、培养目标及专业发展方向等的认知程度。结合教学改革的需要,从教学目标、教学内容、教学策略和方法以及形成性评价等方面探讨了专业导论课的课程设计、实施和课程评价。结果显示,医学信息工程专业导论课受到了学生的高度认可,开设导论课是非常有必要的。     

针刀调整脊柱区带治疗原发性失眠临床随机对照研究

目的:观察应用针刀调整脊柱区带治疗原发性失眠临床疗效。方法:将122例原发性失眠患者随机分为3组,分别为:针刀治疗组40例、真针刺对照组41例和安慰针对照组41例。针刀治疗组采用针刀调整脊柱区带法,真针刺对照组采用常规针刺法,安慰针对照组采用安慰针法,评价治疗前后匹兹堡睡眠质量指数量表评分、焦虑自评量表评分、贝克抑郁量表评分、总睡眠时间、入睡潜伏期的变化,评价临床疗效。结果:经配对秩和检验,针刀治疗组、真针刺对照组治疗前后焦虑自评量表、贝克抑郁量表、匹兹堡睡眠质量指数量表比较,差异有统计学意义(P0.05)。安慰针对照组治疗前后焦虑自评量表、贝克抑郁量表比较,差异有统计学意义(P0.05),匹兹堡睡眠质量指数量表比较,差异无统计学意义(P0.05)。经多组独立样本秩和检验,治疗后3组间匹兹堡睡眠质量指数比较,差异有统计学意义(P0.05),而焦虑自评量表、贝克抑郁量表比较,差异无统计学意义(P0.05)。经两组独立样本秩和检验,匹兹堡睡眠质量指数量表,针刀治疗组与真针刺对照组、针刀治疗组与安慰针对照组、真针刺对照组与安慰针对照组比较,差异均有统计学意义(P0.0167)。经配对秩和检验,针刀治疗组、真针刺对照组治疗前后入眠潜伏期、总睡眠时间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。安慰针对照组治疗前后入眠潜伏期比较,差异有统计学意义(P0.05);安慰针对照组治疗前后总睡眠时间比较,差异无统计学意义(P0.05)。经多组独立样本秩和检验,治疗后3组间入眠潜伏期和总睡眠时间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。经两组独立样本秩和检验,入眠潜伏期和总睡眠时间指标,针刀治疗组与安慰针对照组、真针刺对照组与安慰针对照组比较差异均有统计学意义(P0.016 7)。以匹兹堡睡眠质量指数评价临床疗效,经等级资料多组样本秩和检验,针刀治疗组疗效优于真针刺对照组和安慰针对照组(Z=53.78,P=0.0010.05)。结论:针刀调整脊柱区带治疗原发性失眠安全高效。     

清肠解毒方对大肠癌术后复发化疗患者肿瘤标记物水平及生活质量的影响

摘 要 目的: 探讨清肠解毒方对大肠癌术后复发化疗患者的生活质量及肿瘤标记物水平的影响。方法:选取出现复发的大肠癌患者60例，随机分为观察组与对照组各30例。两组化疗方案均为奥沙利铂联合卡培他滨或者盐酸伊立替康联合卡培他滨，观察组加用清肠解毒方治疗。比较两组患者治疗前后血清CEA、AFP、CA 125、CA 199水平与ECOG评分变化。结果: 两组患者治疗后血清CEA、AFP、CA 125、CA 199水平显著低于治疗前（P＜0.05）。此外，治疗后观察组患者的血清CEA和CA 199水平显著低于对照组（P＜0.05）。生活质量方面，治疗后两组患者ECOG评分均显著低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；且观察组患者治疗后ECOG评分显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论: 清肠解毒方能够明显改善大肠癌术后化疗患者的生活质量，降低血清肿瘤标记物浓度，值得临床应用。     

通窍活血汤含药脑脊液对OGD/R损伤大鼠BMECs的保护作用

目的:探讨通窍活血汤含药脑脊液对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)的保护作用及潜在机制。方法:通过酶消化法提取原代BMECs,并将细胞随机分为6组,分别为正常组,OGD/R组,通窍活血汤(TQHXT)组(20%),尼莫地平(NMDP)组(10μmol·L~(-1)),卡博替尼(BMS)组(1μmol·L~(-1))和合用药组。除正常组外,其余各组细胞在氧糖剥夺2 h后迅速复糖复氧24 h进行OGD/R造模并分组给药。采用细胞免疫荧光染色法鉴定BMECs,观察OGD/R损伤大鼠BMECs的形态学和超微结构改变并检测细胞跨膜电阻(TEER)值变化。用试剂盒检测细胞内一氧化氮(NO)水平、乳酸脱氢酶(LDH)活性、活性氧(ROS)荧光强度和组织型纤溶酶原激活因子(tPA)含量。采用流式细胞术检测细胞内钙离子浓度及细胞凋亡,观察血管新生标记因子CD34的表达,用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中紧密连接蛋白(ZO-1),血管内皮生长因子(VEGF),黏着斑激酶(FAK)和桩蛋白(Paxillin)蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,OGD/R组细胞皱缩、变圆,细胞TEER值和细胞中ZO-1蛋白表达显著降低,细胞中NO,LDH及ROS水平显著升高,tPA含量显著降低,细胞中钙离子浓度和细胞凋亡显著增加,细胞中CD34有所表达,VEGF,FAK和Paxillin蛋白表达显著升高(P0. 01);与OGD/R组比较,TQHXT组细胞损伤明显改善,细胞TEER值和细胞中ZO-1蛋白表达显著升高,细胞中NO,LDH及ROS含量显著降低,tPA含量显著升高,细胞中钙离子浓度和细胞凋亡显著减少,细胞中CD34表达增加,VEGF,FAK和Paxillin蛋白表达显著升高(P0. 05,P0. 01)。结论:通窍活血汤含药脑脊液对OGD/R损伤大鼠BMECs具有保护作用,该保护作用可能是通过VEGF/VEGF受体2(R2)/FAK/Paxillin信号通路促进血管生成来发挥作用。     

不同氮素形态和浓度水平对浙贝母产量和品质的影响

目的:研究不同氮素形态配施对浙贝母产量和品质的影响,为浙贝母氮肥的科学施用及重庆地区的迁地引种提供依据。方法:采用盆栽试验法,研究了2种氮素形态的5种浓度水平即硝态氮(NO_3~--N)-铵态氮(NH_4~+-N)为15∶0(N1),12∶3(N2),7. 5∶7. 5(N3),3∶12(N4),0∶15(N5)处理下,引种栽培的浙贝母生长及生理生化、土壤因子、生物碱含量及产量的变化。结果:与不施氮(CK)处理组相比,不同氮素营养配施对浙贝母生长和品质均有显著提高,相互间存在差异。其中,随着铵态氮浓度的增加:①在硝态氮-铵态氮比为3∶12时,株高、超氧化物歧化酶(SOD)活性达到最大,较CK组分别增加了9. 27%,206. 62%;②在硝态氮-铵态氮比为0∶15时,叶长,叶宽,茎粗,叶绿素a,叶绿素b,叶绿素总量,速效磷含量,有机质含量、总生物碱含量/产量达到最大,分别高于CK处理组14. 02%,16. 44%,13. 68%,40. 75%,45. 31%,41. 72%,77. 70%,14. 70%,24. 61%/47. 39%;随着硝态氮浓度的增加;③在硝态氮-铵态氮比为7. 5∶7. 5时,叶形指数、可溶性蛋白含量、贝母辛含量/产量、贝母素乙产量、鳞茎干重均达到最大,分别高于CK处理组2. 54%,5. 92%,21. 76%/54. 55%,60. 61%,26. 93%;④在硝态氮-铵态氮比为12∶3时,类胡萝卜素含量、色素含量、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、贝母素甲含量/产量、贝母素乙含量、贝母素(甲+乙)含量/产量、贝母素(甲+乙)+贝母辛含量/产量、鳞茎湿重均达到最大,分别高于CK处理组45. 39%,45. 31%,271. 38%,67. 45%,39. 82%/64. 87%,36. 01%,38. 90%/63. 80%,37. 03%/61. 57%,20. 29%。结论:较高比例的铵态氮利于浙贝母的生长;而较高比例的硝态氮利于浙贝母鳞茎的生长以及代谢产物生物碱的积累。氮素配比施用(硝态氮-铵态氮比为12:3)较单一形态氮素更有利于提高浙贝母的产量和品质。